近年来,生物药市场需求不断扩容,抗体药物因具有特异性强,靶向性高、治疗效果显著等优势已经成为其重要组成部分,并且呈现多
元化发展。单克隆抗体占据市场的主导地位,常用的抗体筛选技术包括杂交瘤技术、抗体文库筛选 技术、以及 噬菌 体表面展示技术。高通量、快速检测、高精准且操作简单的抗体筛选检测方法能够提高药物的开发成功率。ELISA作为经典的抗体筛选方法,通常在96孔板中进行检测,因需要包板和反复洗板等,具有通量低(96 tests)、实验耗时长(1.5days)等一系列问题。均相发光检测技术能够克服传统ELISA的检测弊端,仅需要简单的加样孵育就可完成检测,简便高效,更适合高通量抗体筛选的研究。
▲ 均相发光原理示意图
为度均相发光法单抗筛选套装
▲ 均相发光法(HiLA)单抗筛选原理图
产品优势
分别采用均相发光法和ELISA法进行检测单克隆抗体筛选的性能。
抗原的构象、表位的可及性、实验环境、检测机制以及抗体自身的特性差异,都可能导致同一抗体在不同免疫检测方法中表现出结合力的差异。由于ELISA为固相结合,具有暴露表位、非生理环境、亲和力评估偏差等局限性;而均相发光方法在均相结合,更接近生理环境、亲和力与动力学更真实,更加适合治疗性抗体开发。
案例分享:细胞上清小鼠IgG筛选实验
为了对比ELISA和均相发光在小鼠上清IgG的筛选性能,采用均相发光法和ELISA法对细胞上清中的小鼠IgG进行平行筛选。ELISA的具体筛选实验流程参考,详情可点击:https://mp.weixin.qq.com/s/ZRgyHSQ9zy05aiQ4nkKrBg,在均相发光法单抗筛选过程中,首先使用小鼠总lgG检测试剂盒(SH2505)对细胞上清中的IgG进行定量分析,并将其统一调整至相同浓度,有效消除因IgG浓度差异导致的结果偏差。
结果显示,两种方法的阴阳性符合率达到100%。与ELISA法相比,均相发光法筛选套装采用抗His抗体进行检测,避免了抗标签抗体可能产生的假阳性干扰,因此具有更高的检测可靠性。
胞上
清小鼠IgG筛选实验
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